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河南歐諾生物科技有限公司


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四環(huán)素酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒

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參   考   價(jià): 666

訂  貨  量: ≥1 件

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)Ounuo99006

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地鄭州市

聯(lián)系方式:李女士查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間:2025-04-03 11:28:00瀏覽次數(shù):74次

聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 食品機(jī)械設(shè)備網(wǎng)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
波長(zhǎng)范圍 450nm 產(chǎn)地類別 國(guó)產(chǎn)
功能類型 單一功能(單一項(xiàng)目檢測(cè)) 價(jià)格區(qū)間 0-1萬
檢測(cè)時(shí)間 45min 檢測(cè)通道 1
適用范圍 單一樣品專用型 重復(fù)性 批內(nèi)/間≤10%

本試劑盒利用四環(huán)素抗體與四環(huán)素可產(chǎn)生特異性結(jié)合的性質(zhì),先在酶標(biāo)板上預(yù)包被抗原,再加入標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)和四環(huán)素抗體,樣本四環(huán)素藥物與固定在酶標(biāo)板上的抗原競(jìng)爭(zhēng)四環(huán)素抗體,最后加入底物催化顯色。此時(shí)顯色深度與標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)中四環(huán)素藥物的含量成反比。

詳細(xì)介紹

四環(huán)素酶聯(lián)免疫試劑盒

貨號(hào):Ounuo99006

一、藥物概述及檢測(cè)原理

 歐盟第675/92號(hào)令中初步規(guī)定在肌肉及牛奶中的四環(huán)素族化合物的總量不得超過100ppb,在腎臟,肝臟及雞蛋中分別不得超過600 ppb,300 ppb200ppb。

該四環(huán)素酶聯(lián)免疫試劑盒使用生物技術(shù)開發(fā),具有方便、快速、靈敏等特點(diǎn)。

本試劑盒利用四環(huán)素抗體與四環(huán)素可產(chǎn)生特異性結(jié)合的性質(zhì),先在酶標(biāo)板上預(yù)包被抗原,再加入標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)和四環(huán)素抗體,樣本四環(huán)素藥物與固定在酶標(biāo)板上的抗原競(jìng)爭(zhēng)四環(huán)素抗體,最后加入底物催化顯色。此時(shí)顯色深度與標(biāo)準(zhǔn)品(樣本)中四環(huán)素藥物的含量成反比。

 

二、試劑盒內(nèi)包含組分:

1)      10×標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液:0 ppb、2ppb、6 ppb18 ppb、54 ppb0.5mL/瓶。

2)      96孔酶標(biāo)板:1

3)      四環(huán)素抗體工作液:1瓶(7mL/瓶)

4)      酶標(biāo)二抗工作液:1瓶(7mL/瓶)

5)      20×濃縮洗滌液:1瓶(30 mL/瓶)

6)      10×濃縮復(fù)溶液:1瓶(20 mL/瓶)

7)      底物A液:1瓶(7 mL/瓶)

8)      底物B液:1瓶(7 mL/瓶)

9)      終止液:1瓶(7mL

10)   說明書

11)   蓋板膜

12)   自封袋

13)   合格證

 

三、用戶需要自備的設(shè)備和試劑

儀器:

1)       酶標(biāo)儀(檢測(cè)波長(zhǎng)450 nm、630 nm

2)       電子天平(精度:0.01 g

3)       離心機(jī)(4000 g及以上)

4)       生化培養(yǎng)箱(可調(diào)25℃、37℃、60℃)

5)       旋渦振蕩器

6)       微量移液器:(20μl-200μl、100μl-1000μl各一支、30-300ul八道排槍)

7)       計(jì)時(shí)器

試劑:(試劑均為分析純

1)       去離子水

 

四、樣本檢測(cè)步驟

 

1.        工作液準(zhǔn)備

復(fù)溶工作液:取110×濃縮復(fù)溶液加去離子水9份按照1:9的比例稀釋即得。

洗滌工作液:120×濃縮洗滌液加去離子水19份按照1:19的比例稀釋即得。

1M鹽酸溶液:量取1ml濃鹽酸加去離子水11ml溶解混勻即得。

 

2.       樣品前處理

組織樣本(稀釋倍數(shù):12

1)      準(zhǔn)確稱取1±0.01 g均質(zhì)后的組織樣品于10 mL離心管中;

2)      加入5 mL去離子水,劇烈渦動(dòng)2min;

3)      4000 g以上,離心10 min;

4)      500ul上清液加入500ul復(fù)溶工作液(見5.1)中,渦動(dòng)10min;

5)      50ul進(jìn)行檢測(cè)。

蜂蜜樣本(稀釋倍數(shù):10

1)      精確稱取1±0.01g蜂蜜樣品于10mL離心管中;

2)      加入2mL去離子水,充分渦動(dòng)1 min溶解分散;

3)      100ul溶解液加入400ul復(fù)溶工作液(5.1)中,渦動(dòng)1 0S混勻;

4)      立即取50ul進(jìn)行檢測(cè)。

液態(tài)奶樣本方法一(稀釋倍數(shù):10

1)      將采樣好的液態(tài)奶樣本解凍后于室溫靜置平衡30min以上;

2)      將槍頭伸入原奶樣本下層,小心取出1ml樣本加入2ml離心管中(注意:盡量不要取到上層的奶油);

3)      加入50μL 1M鹽酸(見5.1),強(qiáng)烈震搖1min (或使用渦動(dòng)儀渦動(dòng)30s);

4)      使用離心機(jī)室溫4000 g以上離心10 min;

5)      取上層清亮液體50μL加入另一干凈離心管中(注意:盡量不要取到最上層的奶油),再加入450μL復(fù)溶工作液,強(qiáng)烈震搖1min (或使用渦動(dòng)儀渦動(dòng)30s);

6)      50 μL液體進(jìn)行分析。

液態(tài)奶樣本方法二(稀釋倍數(shù):40

1)      精確量取50ul液態(tài)奶樣品于1950ul復(fù)溶工作液中;

2)      充分渦動(dòng)1 min混勻;

3)      立即取50ul進(jìn)行檢測(cè)。

血清樣本(稀釋倍數(shù):8

1)      100ul樣本加入700ul復(fù)溶工作液(5.1)中,渦動(dòng)1 0S混勻;

2)      立即取50ul進(jìn)行檢測(cè)。

 

3.       檢測(cè)

1)      準(zhǔn)備:將要使用的酶標(biāo)板條插入酶標(biāo)板架上,并記錄各標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,為減小檢測(cè)值波動(dòng)建議做雙孔平行實(shí)驗(yàn)(每個(gè)樣本/標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)兩孔),未使用的酶標(biāo)板條用自封袋密封后,保存于2-8℃環(huán)境中以防變質(zhì);

2)      標(biāo)準(zhǔn)品工作液配制:分別取5個(gè)2ml離心管,標(biāo)記為0、0.2、0.6、1.85.4ppb;于每個(gè)管中加入900ul復(fù)溶工作液,于對(duì)應(yīng)管中加入100ul 10×標(biāo)準(zhǔn)品濃縮液(00、0.22、0.66、1.8185.454);(注:請(qǐng)務(wù)必按需現(xiàn)混現(xiàn)用?。?/span>

3)      加樣:向?qū)?yīng)微孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品工作液/樣品溶液50 μL,再向每孔中加入50 μL酶標(biāo)二抗工作液,再向每孔中加入50 μL抗體工作液;

4)      孵育:輕輕振蕩酶標(biāo)板10 s,使孔內(nèi)液體充分混勻后,蓋好蓋板膜于25℃避光反應(yīng)30 min

5)      洗滌:取出酶標(biāo)板后小心揭開蓋板膜,倒出板孔中液體后,在每孔加 250μL洗滌工作液,浸泡15-30s后倒掉洗滌工作液,然后再加入洗滌工作液重復(fù)洗滌3~4次后,將酶標(biāo)板倒置于吸水紙上,用力拍干;

6)      顯色:在每孔中加入100 μL 底物A和底物B的混合液(注:底物A液、底物B液必須按體積1:1充分混合,混合液在10 min內(nèi)使用,切不可使用金屬容器盛裝、攪拌試劑以免底物變質(zhì)失效);

7)      孵育:輕輕振蕩酶標(biāo)板10 s,使孔內(nèi)液體充分混勻后,蓋好蓋板膜于25℃避光反應(yīng)15 min

8)      終止:在反應(yīng)后的微孔中加入終止液50μL/孔,底物液由藍(lán)變黃表明終止成功。

9)      讀數(shù):終止后的酶標(biāo)板應(yīng)在5 min內(nèi)用酶標(biāo)儀讀數(shù),建議使用450 nm、630 nm雙波長(zhǎng)讀取酶標(biāo)板吸光度值。

4.       計(jì)算結(jié)果

1)      設(shè)各標(biāo)準(zhǔn)品(或樣品)的吸光度平均值為B,零標(biāo)準(zhǔn)(濃度為0 ppb的標(biāo)準(zhǔn)品)吸光度平均值B0(B/B0)00%×1為各標(biāo)準(zhǔn)品(或樣品)對(duì)應(yīng)的吸光度的百分比:

2)      使用半對(duì)數(shù)系統(tǒng)代入標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)的吸光度的百分比,與標(biāo)準(zhǔn)品濃度擬合出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3)      將待檢樣品吸光度的百分比代入擬合出的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中,即可得出樣品對(duì)應(yīng)的濃度,最后乘以樣品相應(yīng)的稀釋倍數(shù),即可得出樣品中檢測(cè)物含量。

 

五、試劑盒參數(shù)

1)      試劑盒靈敏度:0.2 ppb

2)      標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍:0.2 ppb-5.4 ppb;

3)      板內(nèi)變異系數(shù):<5%;

4)      板間變異系數(shù):<15%;

5)      B0吸光度值:>0.8;

6)      回收率:90%±15%

7)      交叉反應(yīng)數(shù)據(jù):

化合物

交叉反應(yīng)

四環(huán)素

100

金-霉素

120

土-霉素

50

強(qiáng)力-霉素(多西-環(huán)素)

20

8)檢測(cè)限:

樣品

檢測(cè)限

組織

3ppb

蜂蜜

5ppb

液態(tài)奶樣本方法一

5ppb

液態(tài)奶樣本方法二

10ppb

血清

2ppb

 

注:ppb=ng/mLng/g。

 

六、分析限制

    本試劑盒為定量或半定量試劑盒,建議用于大量樣本篩查分析。若檢測(cè)結(jié)果為陽性,建議使用儀器方法開展確證實(shí)驗(yàn)(如GC/MS、LC-MS/MS等)。

 

七、試劑盒貯存條件

試劑盒貯存溫度為2-8℃,切勿凍存。

未使用完的酶標(biāo)板須密封保存2-8℃的環(huán)境中。

 

八、注意事項(xiàng)

1)      使用試劑盒前,請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀說明書。

2)      試劑盒使用前,需將盒內(nèi)各組份置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上回溫至室溫(25±2℃)(提示:約1 h)。

3)      試劑使用前需搖勻,混合時(shí)應(yīng)避免出現(xiàn)氣泡。

4)      槍頭為一次性用品,為防止試劑交叉污染,檢測(cè)過程中所用槍頭不得重復(fù)使用。

5)      請(qǐng)勿使用過期試劑盒,不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用。

6)      樣品處理完畢后請(qǐng)立即分析,否則可能影響檢測(cè)結(jié)果。

7)      底物A液、底物B液均為無色透明液體,若在使用前已變成藍(lán)色,或混合后立即變藍(lán),說明試劑已污染或變質(zhì)。

8)      加樣過程在保證精度的前提下一定要迅速,以免反應(yīng)時(shí)間差對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。

9)      終止液中含有硫酸,若不小心濺上皮膚或衣物請(qǐng)立即用大量清水沖洗。



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