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上海力敏實(shí)業(yè)有限公司

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TYOBO KOD-201KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201

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  • 2016-01-31 12:41:47
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【簡(jiǎn)單介紹】

KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201
保真性本公司同類(lèi)產(chǎn)品No1!消除了高保真性PCR酶常見(jiàn)的「無(wú)法擴(kuò)增」的情況??蓪?duì)各種長(zhǎng)度的目的片段保證確實(shí)有效的擴(kuò)增!

【詳細(xì)說(shuō)明】

KOD -Plus-系列酶(TOYOBO)KOD-201

特征1. 優(yōu)良的保真性  

KOD -Plus-系列的酶具有強(qiáng)力3'→5'核酸外切酶活性(Proof-reading活性),相比KOD DNA polymerase,保真性更高,約為Taq DNA polymerase80。zui適用于克隆


特征2. 通過(guò)熱啟動(dòng)提高了PCR反應(yīng)效率
通過(guò)將2種抗KOD單克隆抗體預(yù)混在酶中,抑制了PCR反應(yīng)前常溫狀態(tài)下的多聚酶活性和
3'→5'核酸外切酶活性(該活性是產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的主要原因)??贵w在PCR的zui初變
性步驟即發(fā)生失活,對(duì)擴(kuò)增反應(yīng)沒(méi)有任何影響。

特征3. 延伸性?擴(kuò)增效率的提高
對(duì)反應(yīng)Buffer的組成進(jìn)行了*化的重組,使之較以往的
KOD DNA polymerase延伸性?擴(kuò)
增效率均有很大的提高。


特征4. 超群的耐熱性
因其耐熱性比Taq DNA Polymerase更為優(yōu)良,故可以將熱變性步驟的溫度設(shè)定值提高,對(duì)
GC-rich等容易形成高級(jí)結(jié)構(gòu)的目的片段尤其適用。

特征5. 高PCR成功率【KOD -Plus- Ver.2】
對(duì)難擴(kuò)增的目的片段、長(zhǎng)目的片段的PCR成功率比KOD -plus-更高。另外,也降低了帶入的
逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液對(duì)PCR反應(yīng)的抑制。

<幾點(diǎn)建議>

●PCR產(chǎn)物的克隆

由于本酶的PCR產(chǎn)物已被平滑化,可用平滑末端克隆法進(jìn)行克隆。此時(shí),如已對(duì)載體進(jìn)行了脫磷酸化處理,就需要對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行磷酸化,或使用帶5'磷酸基的引物?!×硗?,由于本酶的PCR產(chǎn)物已被平滑化,不能直接進(jìn)行TA克隆??墒褂冒匆韵路椒ㄩ_(kāi)發(fā)的TA克隆試劑盒「TArget Clone -Plus-」。

●PCR條件的設(shè)定

酶的標(biāo)準(zhǔn)使用量為50μl反應(yīng)體系1U。延伸反應(yīng)在68℃條件下進(jìn)行,按1kb目的片段
1min.的標(biāo)準(zhǔn)。出現(xiàn)拖尾條帶時(shí),可降低MgSO4濃度,無(wú)法確認(rèn)到擴(kuò)增時(shí),可提高
MgSO4濃度。

●GC-rich模板的情況

在反應(yīng)液中添加終濃度為2?5%的DMSO可得到改善。

●以RT反應(yīng)液為模板的情況

過(guò)量帶入RT反應(yīng)液有可能會(huì)對(duì)PCR反應(yīng)產(chǎn)生抑制作用。建議帶入到PCR的RT反應(yīng)液在
PCR反應(yīng)液的1/25以下(在1/50以下)。這樣就無(wú)需考慮RT反應(yīng)液中Mg2+、dNTPs的影響,只要按照基本反應(yīng)條件添加本酶中添付的dNTPs和MgSO4即可。

品名

包裝

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Code No.

價(jià)格

KOD -Plus-

200U×1

-20℃

KOD-201

RMB  800

(200U×1)×5

-20℃

KOD-201B

 RMB  3700

KOD -Plus- Ver.2

200U×1

-20℃

KOD-211

 RMB  1000

(200U×1)×5

-20℃

KOD-211B

 RMB  4600

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品名 包裝 保存溫度 Code No. 價(jià)格

定點(diǎn)突變導(dǎo)入試劑盒
KOD -Plus- Mutagenesis Kit

20次

-20℃

SMK-101

RMB 1500

KOD用TA克隆試劑盒
TArget Clone-Plus-

10次

-20℃

TAK-201

RMB   380

KOD -Plus-用Buffer

1ml

-20℃

KOD-2B

RMB    50 

KOD -Plus-用MgSO4

1ml

-20℃

KOD-2S

RMB    50 

KOD -Plus- Ver.2用Buffer

1ml

-20℃

KOD-3B

RMB    50 


    
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