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Hoechst 33258染色液(1mg/ml)使用說明書

來源:南京森貝伽生物科技有限公司   2019年04月24日 11:40   1299

Hoechst 33258染色液(1mg/ml)使用說明書

【產(chǎn)品組成】

Component

SBJ-1804S

Store at

Hoechst 33258染色液(1mg/ml)

1ml

-20℃,避光

【保存條件】

—20℃,避光,12個(gè)月

【產(chǎn)品概述】

  Hoechst 33258 也稱 bisBenzimide H 33258或HOE 33258 ,分子式為C25H24N6O · 3HCl。Hoechst 33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對(duì)細(xì)胞的毒性較低,常用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。Hoechst 33258也用于普通的細(xì)胞核染色、DNA 染色。Hoechst 33258 染色液是濃縮的儲(chǔ)存液,稀釋后使用,一般推薦工作濃度為 1~5μg/ml,用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。

【使用方法】

(一)固定的組織細(xì)胞染色

1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求,用無菌去離子水稀釋到自己所需濃度,即為Hoechst 33258染色工作液。細(xì)胞核染色時(shí),一般推薦工作濃度為1~5μg/ml。

2、于細(xì)胞或組織樣品,固定后沖洗去除固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色,則*行免疫熒光染色,染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色,如果不需要進(jìn)行其它染色,則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色。

2、室溫放置,輕輕吸除Hoechst 33258染色液。

4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2~3次,每次3~5min。

5、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。

(二)活細(xì)胞染色

1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求,用無菌去離子水稀釋到自己所需濃度,即為Hoechst33258染色工作液。細(xì)胞核染色時(shí),一般推薦工作濃度為1~5μg/ml。

2、取96、24、6孔板培養(yǎng)細(xì)胞至合適狀態(tài),按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、

6孔板加入1ml的比例,加入適當(dāng)?shù)腍oechst 33258染色液,染液必須充分覆蓋細(xì)胞。

3、在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的條件下培養(yǎng)。

4、輕輕吸除Hoechst 33258染色液。

5、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2~3次。

6、進(jìn)行熒光檢測。

【注意事項(xiàng)】

1、Hoechst 33258染色液(1mg/ml)應(yīng)稀釋至合適的濃度后使用。

2、熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡快檢測?;罴?xì)胞或組織染色后宜立即觀察。

3、為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4、避免反復(fù)凍融,否則容易失效。

5、Hoechst 33258對(duì)人體有一定刺激性,請注意適當(dāng)防護(hù)。

6、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

關(guān)鍵詞:顯微鏡
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