
技術(shù)交流 技術(shù)方案 采購指南 話題討論 維修保養(yǎng) 資料下載 企業(yè)案例 會員報道
EDTA脫鈣液使用說明書
【產(chǎn)品組成】
Component | SBJ-0312S | SBJ-0312M | Store at |
EDTA 脫鈣液 | 500ml | 5L | 4℃ |
【保存條件】
4℃,12個月
【產(chǎn)品概述】
在組織切片過程中,一些組織內(nèi)含有a骨質(zhì)或鈣化灶時,含鈣的組織不宜直接用石蠟包埋切片。這是因為鈣和石蠟之間的密度不同,較難切出完整的切片。對含鈣組織建議固定之后,再進行脫鈣或二者同時進行。然后進行下游操作如脫水、透明、浸蠟、包埋、切片。用于脫鈣的試劑很多,脫鈣劑包括有機酸、無機酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及電解法脫鈣。EDTA是一種相對較好的螯合脫鈣劑,對組織結(jié)構(gòu)影響小,可以較好的保存組織的某些酶類,經(jīng)EDTA脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢,一般脫需要數(shù)周至數(shù)月。
EDTA 脫鈣液主要由EDTA、磷酸鹽等組成,pH值為7.2。其優(yōu)點是:①經(jīng)EDTA 脫鈣的組織染色結(jié)果好;②對組織的結(jié)構(gòu)損害小。其缺點是:①脫鈣速度很慢,不適合常規(guī)標(biāo)本脫鈣使用;②脫鈣后組織會稍微變硬;③不宜用化學(xué)方法確定脫鈣終點。
【使用方法】
1、骨組織脫鈣時,取材不易過厚,一般大約5mm。
2、組織固定后,用PBS清洗3次,每次20min。
3、組織用蒸餾水洗清洗3次,每次20min。
4、組織轉(zhuǎn)移至20~30倍體積的EDTA 脫鈣液中,脫鈣10~30天或更長時間。如果想加快脫鈣速度,可以置于37℃進行脫鈣。如果必要,更換新的EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣,多數(shù)組織脫鈣2周~3個月即可,每周更換一次直至終點。亦可采用微波快速脫鈣法:微波爐設(shè)在200W左右的檔位,每次加熱5min,依據(jù)組織厚度和密度重復(fù)3~5min,中間間隔3~5min。
5、用蒸餾水沖洗數(shù)次。
6、常規(guī)脫水、包埋。
【注意事項】
1、厚度5mm的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣10~30天即可,大多數(shù)在14~60天即可。
2、適當(dāng)加溫能加快脫鈣的速度,一般不應(yīng)超過37~40℃,溫度過高容易使骨組織造成松散解體,尤其不可大于60℃。
3、脫鈣應(yīng)*,防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應(yīng)控制在不影響組織切片的同時盡量縮短脫鈣時間,以免脫鈣過長引起組織損害。
4、脫鈣用具避免使用金屬容器,盡量使用玻璃容器。
5、骨組織脫鈣應(yīng)先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行,不應(yīng)先脫鈣后固定,以便減少組織的損傷程度。
6、每隔一段時間檢測一次脫鈣程度,脫鈣過度會增加組織的損傷程度,影響染色結(jié)果。
7、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
上一篇:餐廚垃圾處理器的特點
本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其它來源(非食品機械設(shè)備網(wǎng)www.omgrnib.cn)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點或和對其真實性負責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
免費注冊后,你可以
了解食品行業(yè)更多資訊查看食品行業(yè)供求信息凸顯食品行業(yè)自身價值 馬上注冊會員想快速被買家找到嗎
只需要發(fā)布一條商機,被買家找到的機會高達90%!還等什么? 馬上發(fā)布信息