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根據(jù)國標(biāo)GB/T5009.199-2003,有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰酯酶有抑制作用,從而影響乙酰酯酶、硫代乙酰(作為底物)、二硫代二硝基苯甲酸(作為顯色液)間的顯色反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)后溶液顏色的深淺即可計算出樣品中的農(nóng)藥殘留量;如果乙酰酯酶被抑制程度越嚴(yán)重,則反應(yīng)而生成的黃色化合物也越少,說明檢測樣品中農(nóng)藥殘留越多,反之越少;而生成的黃色物質(zhì)在412 nm處有的吸收峰,由此可對樣品中有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)行定量測定。
農(nóng)藥殘留是農(nóng)藥使用后一個時期內(nèi)沒有被分解而殘留于生物體、收獲物、土壤、水體、大氣中的微量農(nóng)藥原體、有毒 代謝物、 降解物和雜質(zhì)的總稱。施用于作物上的農(nóng)藥,其中一部分附著于作物上,一部分散落在土壤、大氣和水等環(huán)境中,環(huán)境殘存的農(nóng)藥中的一部分又會被植物吸收。殘留農(nóng)藥直接通過植物果實(shí)或水、大氣到達(dá)人、畜體內(nèi),或通過環(huán)境、食物鏈最終傳遞給人、畜。造成蔬菜農(nóng)藥殘留量超標(biāo)的主要是一些國家禁止在蔬菜生產(chǎn)中使用的有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥,如、、、、甲基等。食用含有大量高毒、劇毒農(nóng)藥殘留引起的食物會導(dǎo)致人、畜急性中毒事故。長期食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的農(nóng)副產(chǎn)品,雖然不會導(dǎo)致急性中毒,但可能引起人和動物的慢性中毒,導(dǎo)致疾病的發(fā)生,誘發(fā)癌癥,甚至影響到下一代。 【農(nóng)藥殘留檢測試劑盒檢測原理】 根據(jù)國標(biāo)GB/T5009.199-2003,有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰酯酶有抑制作用,從而影響乙酰酯酶、硫代乙酰(作為底物)、二硫代二硝基苯甲酸(作為顯色液)間的顯色反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)后溶液顏色的深淺即可計算出樣品中的農(nóng)藥殘留量;如果乙酰酯酶被抑制程度越嚴(yán)重,則反應(yīng)而生成的黃色化合物也越少,說明檢測樣品中農(nóng)藥殘留越多,反之越少;而生成的黃色物質(zhì)在412 nm處有的吸收峰,由此可對樣品中有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)行定量測定。 檢測結(jié)果以乙酰酯酶被抑制程度(抑制率)表示,計算公式為:抑制率(%)=(ΔAc-ΔAs)/ ΔAc×99%;式中,ΔAc為對照組3分鐘后與3分鐘前的吸光值之差;ΔA s為樣品組3分鐘后與3分鐘前的吸光值之差。 【農(nóng)藥殘留檢測試劑盒檢測對象】 蔬菜、水果、茶葉、糧食、肉、蛋、奶、水產(chǎn)品等。 【農(nóng)藥殘留檢測試劑盒技術(shù)指標(biāo)】 檢測下限:1% (抑制率) 檢測范圍:0-99% (抑制率) 【生產(chǎn)日期】 生產(chǎn)日期:見外包裝。 【保 質(zhì) 期】 保質(zhì)期:12個月(4℃冷藏)。 【農(nóng)藥殘留檢測試劑盒試劑配制】 ① 緩沖液:將緩沖液試劑袋中的試劑倒出,溶于500ml 蒸餾水中,溶解、混勻即可。 ② 底物:往標(biāo)注為底物的瓶中加入10.3ml蒸餾水。2~4oC環(huán)境下冷藏保存。 ③ 顯色劑:往標(biāo)注為顯示劑的瓶中加入26ml的緩沖液,輕搖使溶解。 ④ 酶試劑:酶試劑已配成溶液可直接使用。平常要在2~4oC環(huán)境條件下冷藏保存。 以上試劑不使用時,需放在2~4oC環(huán)境條件下冷藏保存;使用時,從冰箱取出,放置室溫后進(jìn)行檢測。 【執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】 ① 根據(jù)國標(biāo)GB/T5009.199-2003,樣品的抑制率小于等于40%為合格樣品,樣品的抑制率在40~50%之間為可疑農(nóng)殘超標(biāo)樣品; ② 抑制率>50%為農(nóng)殘超標(biāo)樣品,表明被測樣品的農(nóng)藥殘留毒性可能超過安全的界定標(biāo)準(zhǔn),建議用氣相色譜等儀器分析法作進(jìn)一步確認(rèn)。 蔬菜樣品的抑制率 蔬菜品質(zhì) 評價和建議 0%< 檢測抑制率<15 % 無污染蔬菜 基本上可以放心出口 15%< 檢測抑制率<30 % 綠色蔬菜 處理和檢驗后可以出口 30%< 檢測抑制率<50 % 無公害蔬菜 可以安全食用 50%< 檢測抑制率<99% 有農(nóng)藥污染蔬菜 不能安全食用 【注意事項】 ① 加入底物后,應(yīng)迅速混勻,立即測試。 ② 若浸提液清澈無色或顏色較淺,取上清液待測; 若浸提液混濁,離心,取上清液待測; 若浸提液色素干擾嚴(yán)重,可用活性炭脫色,具體方法如下: 將浸提液轉(zhuǎn)移至另一個三角瓶中,加入0.1~0.5g活性碳(根據(jù)顏色深淺調(diào)整),水浴70℃加熱5分鐘,取出趁熱過濾,濾液待測。 ③ 蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有對酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽性。處理這類樣品時,可采取整株(體)浸提,避免次生物物質(zhì)干擾。 ④ 所用的檢測液對皮膚均具有不同程度的傷害,使用時請做好防護(hù)。不慎沾到皮膚應(yīng)立即擦干并用大量水沖洗。 ⑤ 檢測試劑請務(wù)必在2~4oC冰箱保存。
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