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DAPI染色液（5ug/ml,含封片劑）使用說明書
閱讀：916 發(fā)布時(shí)間：2019-4-12| 提 供 商 | 南京森貝伽生物科技有限公司 | 資料大小 | 49KB |
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DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)使用說明書
【產(chǎn)品組成】
Component | SBJ-0221S | Store at |
DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑) | 10ml | -20℃,避光 |
【保存條件】
-20℃,避光,6個(gè)月
【產(chǎn)品概述】
DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是適用于常見細(xì)胞和組織細(xì)胞核染色的染色液。DAPI，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidinedihy drochloride，也稱DAPIdihydrochloride，分子式為C16H15N5•2HCl，分子量為350.25，是可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光，靈敏度高于EB。
DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的大激發(fā)波長(zhǎng)為340nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為488nm，DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后，大激發(fā)波長(zhǎng)為364nm，大發(fā)射波長(zhǎng)為454nm。DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)可以直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，亦可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求，秲釋到相應(yīng)濃度后進(jìn)行染色，無(wú)需單獨(dú)封片步驟。一般*工作濃度為0.5～10μg/ml。
【使用方法】
1、對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則*行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行DAPI染色，如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的DAPI染色。對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)，覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品3倍體積以上的DAPI染色液，充分混勻。
2、室溫放置5～8min。
3、輕輕吸除DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)。
4、用無(wú)菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。
5、無(wú)需封片，直接在熒光顯微鏡下觀察。
【染色結(jié)果】
細(xì)胞収生凋亡時(shí)，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
【注意事項(xiàng)】
1、DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)的濃度適用于絕大多數(shù)常觃染色的需要。
2、熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測(cè)。
3、避免反復(fù)凍融，否則容易失效。
4、DAPI對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。