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DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)使用說明書

【產(chǎn)品組成】

【保存條件】

 -20℃,避光,6個(gè)月

【產(chǎn)品概述】

  DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是適用于常見細(xì)胞和組織細(xì)胞核染色的染色液。DAPI，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidinedihy drochloride，也稱DAPIdihydrochloride，分子式為C16H15N5•2HCl，分子量為350.25，是可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光，靈敏度高于EB。

  DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的大激發(fā)波長為340nm，大發(fā)射波長為488nm，DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后，大激發(fā)波長為364nm，大發(fā)射波長為454nm。DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)可以直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，亦可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求，秲釋到相應(yīng)濃度后進(jìn)行染色，無需單獨(dú)封片步驟。一般*工作濃度為0.5～10μg/ml。

【使用方法】

1、對于細(xì)胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑。如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則*行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行DAPI染色，如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的DAPI染色。對于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品3倍體積以上的DAPI染色液，充分混勻。

2、室溫放置5～8min。

3、輕輕吸除DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)。

4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。

5、無需封片，直接在熒光顯微鏡下觀察。

【染色結(jié)果】

細(xì)胞収生凋亡時(shí)，會看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。

【注意事項(xiàng)】

1、DAPI染色液(5ug/ml,含封片劑)的濃度適用于絕大多數(shù)常觃染色的需要。

2、熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測。

3、避免反復(fù)凍融，否則容易失效。

4、DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護(hù)。