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BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒使用說明書

閱讀:900          發(fā)布時間:2019-4-10
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BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒使用說明書

【產(chǎn)品組成】

Component

SBJ-1049S

Store at

試劑(A): Alkaline Phosphatase Color Buffer

50ml

4℃

試劑(B): BCIP solution(300×)

175μl

4℃,避光

試劑(C): NBT solution(150×)

350μl

4℃,避光

【保存條件】

4℃,避光,12個月。

【產(chǎn)品概述】

  BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒(BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit)是一種用于免疫組化顯色、Western等膜顯色和誘導多功能干細胞iPS鑒定等的試劑盒。BCIP/NBT是堿性磷酸酯酶的常用底物,在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP會被水解產(chǎn)生強反應性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物會和NBT發(fā)生反應,形成不溶性的深藍色至藍紫色的NBT-formazan。

  BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit可用于細胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色包括誘導多功能干細胞iPS的鑒定,也可用于Western等結(jié)合有堿性磷酸酯酶的膜的顯色檢測\細胞或組織內(nèi)源性的堿性磷酸酯酶顯色。

【使用方法】

1、對于組織切片或細胞樣品或膜,在與堿性磷酸酯酶標記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當洗滌液洗滌3~5次,每次3~5min。

2、對于檢測內(nèi)源性堿性磷酸酯酶的組織或細胞樣品,在適當固定后,也用適當洗滌液洗滌3~5次,每次3~5min。

3、按照如下比例依次加入各溶液,混勻后即配制成BCIP/NBT染色工作液:

 

名稱

規(guī)格

規(guī)格

Alkaline Phosphatase Color Buffer

3ml

10ml

BCIP solution(300×)

10μl

33μl

NBT solution(150×)

20μl

66μl

BCIP/NBT染色工作液

3.03ml

11ml

4、洗滌完畢后,去除洗滌液。

5、加入適量BCIP/NBT染色工作液,確保能充分覆蓋樣品。

5、室溫避光孵育5~30min或更長時間(可長達24小時),直至顯色至預期深淺。

6、去除BCIP/NBT染色工作液,用蒸餾水洗滌1~2次即可終止顯色反應。

7、對于組織切片或細胞樣品,顯色反應終止后,如有必要可以用中性紅染色液(neutral red staining solution)染色,以便于觀察。對于膜,顯色反應終止后,可以室溫晾干避光保存。

【注意事項】

1、BCIP對人體有刺激性,NBT對人體有害,請注意適當防護。

2、操作過程中,盡量避免強光照射。

3、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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