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BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒使用說明書
閱讀：942 發(fā)布時間：2019-4-10BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒使用說明書
【產(chǎn)品組成】
Component | SBJ-1049S | Store at |
試劑(A): Alkaline Phosphatase Color Buffer | 50ml | 4℃ |
試劑(B): BCIP solution(300×) | 175μl | 4℃,避光 |
試劑(C): NBT solution(150×) | 350μl | 4℃,避光 |
【保存條件】
4℃,避光,12個月。
【產(chǎn)品概述】
BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒(BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit)是一種用于免疫組化顯色、Western等膜顯色和誘導多功能干細胞iPS鑒定等的試劑盒。BCIP/NBT是堿性磷酸酯酶的常用底物，在堿性磷酸酯酶的催化下，BCIP會被水解產(chǎn)生強反應性的產(chǎn)物，該產(chǎn)物會和NBT發(fā)生反應，形成不溶性的深藍色至藍紫色的NBT-formazan。
BCIP/NBT Alkaline Phosphatase Color Development Kit可用于細胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色包括誘導多功能干細胞iPS的鑒定，也可用于Western等結(jié)合有堿性磷酸酯酶的膜的顯色檢測\細胞或組織內(nèi)源性的堿性磷酸酯酶顯色。
【使用方法】
1、對于組織切片或細胞樣品或膜，在與堿性磷酸酯酶標記的抗體或其它形式的探針孵育后，用適當洗滌液洗滌3～5次，每次3～5min。
2、對于檢測內(nèi)源性堿性磷酸酯酶的組織或細胞樣品，在適當固定后，也用適當洗滌液洗滌3～5次，每次3～5min。
3、按照如下比例依次加入各溶液，混勻后即配制成BCIP/NBT染色工作液：
名稱 | 規(guī)格 | 規(guī)格 |
Alkaline Phosphatase Color Buffer | 3ml | 10ml |
BCIP solution(300×) | 10μl | 33μl |
NBT solution(150×) | 20μl | 66μl |
BCIP/NBT染色工作液 | 3.03ml | 11ml |
4、洗滌完畢后，去除洗滌液。
5、加入適量BCIP/NBT染色工作液，確保能充分覆蓋樣品。
5、室溫避光孵育5～30min或更長時間(可長達24小時)，直至顯色至預期深淺。
6、去除BCIP/NBT染色工作液，用蒸餾水洗滌1～2次即可終止顯色反應。
7、對于組織切片或細胞樣品，顯色反應終止后，如有必要可以用中性紅染色液(neutral red staining solution)染色，以便于觀察。對于膜，顯色反應終止后，可以室溫晾干避光保存。
【注意事項】
1、BCIP對人體有刺激性，NBT對人體有害，請注意適當防護。
2、操作過程中，盡量避免強光照射。
3、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。