菌落總數(shù)的快速測定方法 適用范圍：可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測定。也可用于與食品接觸的容器、操作臺(tái)和其他設(shè)備表面的衛(wèi)生檢測。
菌落總數(shù)的快速測定方法
1 適用范圍 ： 可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測定 。 也可用于與食品接觸的容器 、 操作臺(tái)和其他設(shè)備表
面的衛(wèi)生檢測。
2 方法原理：將營養(yǎng)培養(yǎng)基、凝膠和氯化三苯基四氮唑（ TTC ）顯色劑等加載在試紙片，經(jīng)加樣、培養(yǎng)后，
細(xì)菌菌落在測試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑，通過計(jì)數(shù)報(bào)告結(jié)果。
3 操作方法
3.1 樣品處理 ： 無菌稱取樣品 25g （ 或 25mL ） 放入含有 225mL 無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi) ， 經(jīng)充分
振搖 （ 均質(zhì) ） 做成 1:10 的稀釋液 。 用 1mL 滅菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1mL ， 注入含有 9mL 滅菌生理鹽水的試
管內(nèi) ， 用 1mL 滅菌吸管反復(fù)吸吹制成 1:100 的稀釋液 。 以此類推 ， 做出 1:1000 等稀釋度的稀釋液 ， 每個(gè)稀釋
度更換一支滅菌吸管。
3.2 接種：一般食品選 2 ～ 3 個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測，含菌量少的液體樣品（如食用純水和礦泉水等）可直接用
原液檢測 。 將測試片放在水平臺(tái)面上 ， 揭開上面的透明薄膜 ， 用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液 1mL ， 均勻
加到中央的紙片上，輕輕將上蓋膜放下，靜置 5 min 使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下。每個(gè)稀釋度接
種兩片。
3.3 培養(yǎng) ： 將測試片疊在一起放回原自封袋中 ， 透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi) ， 堆疊片數(shù)不超過 12 片 。
培養(yǎng)溫度為 36 ℃± 1 ℃ ，培養(yǎng) 15 ～ 24h 。
4 結(jié)果判斷與計(jì)數(shù)：
4.1 細(xì)菌在紙片上生長后會(huì)顯示紅色斑點(diǎn) ， 選擇菌落數(shù)適中 （ 10 個(gè)～ 100 個(gè) ） 的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù) ， 乘以稀釋倍
數(shù)后即為每克（或毫升）樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。菌落數(shù)在 100 以內(nèi)時(shí)，按實(shí)有數(shù)報(bào)告。大于 100 時(shí) ，
用二位有效數(shù)字，二位有效數(shù)字后面的數(shù)字，以四舍五入方法計(jì)算，并以 10 的指數(shù)來表示。
4.2 計(jì)數(shù)原則與報(bào)告方式
4.2.1 通常選擇菌落在 10 個(gè)～ 100 個(gè)之間的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見下表中例次 1 ） 。國家
標(biāo)準(zhǔn)菌落總數(shù)報(bào)告方式術(shù)語為 cfu/g 或 mL ， cfu 的含義為菌落形成單位。
4.2.2 若有兩個(gè)稀釋度的菌落數(shù)在 10 個(gè)～ 100 個(gè)之內(nèi)，兩者的比值小于 2 ，則取其平均數(shù)，若大于 2 ，則采
用稀釋度小者報(bào)告。
4.2.3 若三個(gè)稀釋度的菌落數(shù)都有在 10 個(gè)～ 100 個(gè)之內(nèi)時(shí)，應(yīng)選擇二個(gè)低數(shù)值的平均數(shù)。
4.2.4 若三個(gè)稀釋度的菌落數(shù)均小于 10 個(gè)或大于 100 個(gè)時(shí) ， 應(yīng)重新試用更低或更高的稀釋度進(jìn)行菌落計(jì)數(shù) ；
或采用均小于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui小值，或采用均大于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui大值。
5 表面取樣方法 ： 加 1mL 滅菌生理鹽水在測試片上 ， 靜置至少 1h 使培養(yǎng)基凝固 ； 提起上層膜 ， 使中央濾紙
部分貼到待測物表面，用手在外側(cè)輕壓；然后將上蓋膜合上，置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
6 注意事項(xiàng)：使用過的紙片上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
：李菲     :