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《葡萄植株中7種植物激素含量的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)征求意見

2023-11-01 15:07:49 來源：儀表網(wǎng) 閱讀量：9220

　　根據(jù)《中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)法》文件精神，由廣西大學(xué)、廣西西大檢測有限公司、廣西亞熱帶作物研究所、廣西壯族自治區(qū)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)研究院、廣西思浦林科技有限公司共同起草的《葡萄植株中7種植物激素含量的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》征求意見稿已完成，依據(jù)《團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)定》和《廣西農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全服務(wù)協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》的有關(guān)規(guī)定，現(xiàn)向社會(huì)公開征求意見。

　　本文件按照GB/T 1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。

　　本文件描述了液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測定葡萄植株中7種植物內(nèi)源激素含量的原理，規(guī)定了試劑和材料、儀器和設(shè)備、分析步驟、結(jié)果計(jì)算和表述、精密度等的要求。

　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于葡萄植株的葉、芽、果等組織中玉米素、玉米素核苷、赤霉素A3、生長素、水楊酸、茉莉酸、脫落酸含量的測定。

　　原理：

　　試樣用異丙醇混合溶液低溫震蕩提取植物激素，經(jīng)反相色譜柱分離，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法進(jìn)行測定，外標(biāo)法定量。

　　儀器和設(shè)備：

　　1.液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀：配電噴霧離子源(ESI)。

　　2.電子天平：感量0.1mg。

　　3.渦旋混勻器。

　　4.低溫震蕩儀：溫度可至5℃。

　　5.超低溫冰箱：溫度可至-80℃。

　　6.氮吹儀。

　　樣品制備：

　　分別取新鮮的葡萄植株的葉、芽、果等部位供試樣，迅速用超純水洗凈樣品附著的雜物，表面水分用吸水紙擦干，立即保存于液氮中。將樣品從液氮中取出，置于研缽中加液氮磨細(xì)，混勻，立即轉(zhuǎn)移至-80 ℃冰箱避光保存。

　　試樣處理：

　　稱取0.2g(精確至0.1mg)制備好的試樣于15mL 塑料離心管中，加入2mL 預(yù)冷(4 ℃)的提取劑(5.5)，置于5℃震蕩儀中以200r/min 振蕩1h，再加入4mL 預(yù)冷(4 ℃)的二氯甲烷(5.3)，繼續(xù)震蕩1h，取二氯甲烷層氮吹至近干。加入0.5mL 預(yù)冷(4 ℃)的50%甲醇溶液(5.6)復(fù)溶，漩渦混勻，經(jīng)0.22μm 濾膜過濾，濾液供液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定。

　　液相色譜參考條件：

　　a)色譜柱：BEH C18柱，2.1 mm × 100mm，粒度1.7 μm，或性能相當(dāng)者；

　　b)流動(dòng)相：流動(dòng)相A為0.1%甲酸水溶液，流動(dòng)相B為甲醇，梯度洗脫程序見表1；

　　c)流速：0.3mL/min；

　　d)柱溫：40 ℃；

　　e)進(jìn)樣量：5μL。

　　質(zhì)譜參考條件：

　　a)離子源：ESI源；

　　b)掃描方式：正離子掃描模式和負(fù)離子掃描模式(參見附錄B)；

　　c)檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)；

　　d)干燥氣、霧化氣、碰撞氣均為高純氮?dú)?，使用前?yīng)調(diào)節(jié)各氣體流量以使質(zhì)譜靈敏度達(dá)到檢測要求，參考條件參見附錄B；

　　e)監(jiān)測離子對、錐孔電壓、碰撞能量等參數(shù)應(yīng)優(yōu)化至最佳靈敏度，參考條件參見附錄B。

　　精密度：

　　1.在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不大于其算術(shù)平均值的15%。

　　2.在再現(xiàn)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不大于其算術(shù)平均值的20%。

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