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金標(biāo)準(zhǔn)系列猛將：ProPac 3R單分散離子交換色譜柱分析挑戰(zhàn)性蛋白治療藥物

來(lái)源：賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司   ?2024年07月24日 09:12   3195
 

 


ProPac 3R
 
　　近年來(lái)生物制藥發(fā)展迅速，蛋白藥物大多存在翻譯后修飾且種類復(fù)雜多樣，因此研發(fā)過(guò)程中的質(zhì)量控制顯得尤為重要，其中電荷異質(zhì)性是關(guān)鍵質(zhì)量屬性(CQA)之一，其可能影響生物制品的療效，甚至有可能帶來(lái)意想不到的副作用，從而影響藥品的安全性和有效性，所以在抗體藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中選擇一種靈敏度高、特異性強(qiáng)的電荷異質(zhì)性檢測(cè)分析方法，是控制和穩(wěn)定抗體藥物生產(chǎn)質(zhì)量的有效手段。離子交換色譜技術(shù)廣泛用于生物制藥的開(kāi)發(fā)以及蛋白藥物電荷變異體的分離。賽默飛離子交換色譜柱，從ProPac WCX-10開(kāi)始，不斷致力于為客戶帶來(lái)分析流程中的“金標(biāo)準(zhǔn)”。
 
　　ProPac 3R進(jìn)一步完善應(yīng)用方法，提供更優(yōu)的分離度結(jié)果，并采用單分散填料(圖1)解決批次重現(xiàn)性問(wèn)題。它采用生物惰性材料設(shè)計(jì)，可以為蛋白質(zhì)和AAV等分析提供可重復(fù)、高分辨率和耐用的強(qiáng)陽(yáng)/陰離子交換色譜分離，尤其在具有挑戰(zhàn)性的多抗、融合蛋白、ADC及復(fù)方共制劑等新興治療藥物電荷異質(zhì)體分析中提供更高分辨率和重現(xiàn)性。“3R”取至穩(wěn)健性(Robustness)、重現(xiàn)性(Reproducibility)、分辨率(Resolution)英文的首字母，突出體現(xiàn)了3R的性能優(yōu)勢(shì)，孔徑也從傳統(tǒng)的10μm升級(jí)至小粒徑的3μm。

圖1  3μm單分散ProPac 3R粒子(左)與3μm多分散粒子(右)的SEM圖像

 
　　雙特異性抗體
 
　　圖2展示在鹽梯度條件下，ProPac 3R SCX (4x100 mm,3 μm)色譜柱與傳統(tǒng)單分散強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱在分析雙抗電荷異質(zhì)體中的對(duì)比，ProPac 3R不僅在分辨率上有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，在響應(yīng)上也有顯著優(yōu)勢(shì)。

圖2  ProPac 3R SCX色譜柱與多分散強(qiáng)陽(yáng)離子交換在雙抗的分離譜圖

 
　　融合蛋白
 
　　圖3展示在鹽梯度條件下，ProPac 3R SAX (4x100 mm,3 μm)色譜柱與傳統(tǒng)單分散強(qiáng)陰離子交換色譜柱在分析融合蛋白電荷異質(zhì)體中的對(duì)比，ProPac 3R在各組分分離上有較大的提升，更有利于后期制備后MS表征。

圖3  ProPac 3R SAX色譜柱與多分散強(qiáng)陰離子交換在融合蛋白的分離譜圖

 
　　抗體偶聯(lián)藥物ADC
 
　　圖4展示在商品化CX-1 PH buffer條件下，ProPac 3R SCX (4x100 mm,3 μm)色譜柱與傳統(tǒng)單分散強(qiáng)陽(yáng)離子交換色譜柱在分析ADC電荷異質(zhì)體中的對(duì)比，ProPac 3R在特別難分的酸性變異體中有更高的分辨率，為QC放行提供更穩(wěn)定的方法。

圖4  ProPac 3R SCX色譜柱與多分散強(qiáng)陽(yáng)離子交換在ADC的分離譜圖

 
　　復(fù)方共制劑
 
　　復(fù)方共制劑是有兩種及以上蛋白藥物按照不同比例組成的，蛋白比例和每種蛋白酸堿變異體的比例是需要檢測(cè)的，這給離子交換液相色譜法帶來(lái)巨大的挑戰(zhàn)。圖5展示在商品化CX-1 PH buffer條件下，ProPac 3R SCX (4x100 mm,3 μm) 不僅得到了兩種不同蛋白比值與理論值一致的結(jié)果，而且可以得到每種蛋白各自酸堿變異體的比值。

圖5 ProPac 3R SCX色譜柱在復(fù)方共制劑的分離譜圖

 
　　結(jié)論
 
　　ProPac 3R單分散色譜柱在多特異性抗體、ADC、融合蛋白和復(fù)方共制劑分析中均表現(xiàn)出優(yōu)越的分離性能和很高的靈敏度，且單分散的填料保證了批與批之間結(jié)果的穩(wěn)定性，方法耐用性的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)一步提升。
 
　　訂貨信息

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