產(chǎn)品品牌： 美國*
商品介紹：產(chǎn)品編號
915
產(chǎn)品名稱
白介素-2（IL-2） 人
中文產(chǎn)品名稱
白介素-2 人
英文產(chǎn)品名稱
IL-2 human
方法
酶聯(lián)免疫/酶免法（ELISA）
關(guān)鍵詞（keyword）:human IL-2 , human 白介素-2 , human白介素-2 , IL-2 , 白介素-2 , 白介素-2（IL-2） , 人 IL-2 , 人 白介素-2 , 人IL-2 , 人白介素-2
說明書
用途:
臨床意義:
1976年Morgan等發(fā)現(xiàn)小鼠脾細胞培養(yǎng)上清中含有一種刺激胸腺細胞生長的因子，由于這種因子能促進和維持T細胞長期培養(yǎng), 稱為T細胞生長因子 （T cell growth factor, TCGF）,1979年統(tǒng)一命名為白細胞介素2（interleukin 2,IL-2）。
1. IL-2的產(chǎn)生 IL-2主要由T細胞或T細胞系產(chǎn)生。
（1）CD4陽性或CD8陽性T細胞:有絲分裂原刺激CD4陽性或CD8陽性T細胞亞群均可產(chǎn)生IL-2同種異體抗原主要刺激 CD4陽性T細胞分泌IL-2。PBMC、脾臟、淋巴結(jié)和扁桃腺中的T細胞受到刺激后都能產(chǎn)生IL-2。在小鼠Th細胞中，只有Th1亞群可產(chǎn)生IL-2。
?。?）T細胞腫瘤細胞系或白血病細胞系: 人和動物某些T細胞白血病細胞系或腫瘤細胞在有絲分裂原、鈣離子載體（如 A23187） 或PMA刺激下可產(chǎn)生高水平的IL-2。如長臂猿T細胞系MLA144可自發(fā)產(chǎn)生IL-2,小鼠胸腺瘤細胞系EL-4和人Jurkat細胞靜止狀態(tài)不合成和分泌IL-2,刺激后可分泌高水平的IL-2。
?。?）T淋巴細胞雜交瘤: T淋巴細胞雜交瘤123,FS6-14.13, HT-24A等在ConA刺激下產(chǎn)生IL-2。
?。?）應(yīng)用基因工程技術(shù)制備: 1983年Taniguchi等從ConA刺激的Jurkat白血病T細胞中克隆成功IL-2cDNA，并在大腸桿菌中得到高水平的表達。目前應(yīng)用基因工程技術(shù)所制備和純化的IL-2已用于臨床治療某些腫瘤和其它疾病。
2. IL-2的分子結(jié)構(gòu)和基因 人IL-2含有133氨基酸殘基，分子量為15.5kDa。天然IL-2在N端含有糖基，但糖基對IL-2的生物學活性無明顯影響，等電點在6.6～8.2。 IL-2分子含有3個半胱氨酸，分別位于第58、105和125位氨基酸，其中58位與105位半胱氨酸之間所形成的鏈內(nèi)二硫鍵對于保持IL-2生物學活性起重要作用。在IL-2基因產(chǎn)物的提純和復(fù)性過程中，如二硫鍵配錯或分子間形成二硫鍵都會降低IL-2的活性?，F(xiàn)已有應(yīng)用點突變， 將第125號位半胱氨酸突變?yōu)榱涟彼峄蚪z氨基，使只能形成一種二硫鍵，保證了在IL-2復(fù)性過程的活性。還有報道用蛋白工程技術(shù)生產(chǎn)新型rIL-2，將IL-2分子第125位半胱氨酸改為丙氨酸, 改構(gòu)后IL-2比活性比天然IL-2明顯增加。人IL-2基因定位于第4號染色體，長約5kb，由４個外顯子和3個內(nèi)含子組成。人和小鼠IL-2基因DNA序列有63％同源性。
3. IL-2的受體 IL-2R是由α、β和γ三條鏈組成。
（1）IL-2Rα鏈: Uchiyama（1981）*制備了抗活化T細胞抗原（Tac）的McAb，與IL-2相互競爭結(jié)合到Tac陽性細胞。Tac的分子量為55kDa。1984年Leonard將Tac分子的cDNA克隆成功。Tac分子為糖蛋白，由272個氨基殘基組成，包括21個氨基酸殘基信號肽， 成熟分子含251個氨基酸，含有多個半胱氨酸，2個N-糖基化位點， 穿膜區(qū)和胞漿區(qū)分別含19和 13 個氨基酸殘基。人Tac的基因定位于第10號染色體，包括8個外顯子和7個內(nèi)含子,長約25kb。Tac（p55）即為IL-2受體α鏈（或亞單位），又稱CD25，是活化T淋巴細胞的標志。 在骨髓移植中如除去Tac 陽性供體細胞可以降低移植物抗宿主反應(yīng) （GVHR），現(xiàn)已進入Ⅱ期臨床驗證。 也可用抗IL-2R McAb選擇性地封閉、消除活化的效應(yīng)細胞，從而治療同種異體移植物排斥反應(yīng)及某些自身免疫性疾病。
?。?）IL-2Rβ鏈: 分子量70kDa，故又稱p70，在人白細胞分化抗原中編號為CD122。 人IL-2Rβ鏈基因定位于22號染色體。成熟IL-2Rβ鏈有525個氨基酸，5個N糖基化位點,包括胞膜外區(qū)、穿膜區(qū)和胞漿區(qū)。胞膜外區(qū)由214個氨基酸組成，有8個Cys，其結(jié)構(gòu)上有1個紅細胞生成素（EPO）受體超家族特征性的結(jié)構(gòu)域，還有1個Ⅲ型纖維粘連蛋白結(jié)構(gòu)域?？缒^(qū)25個氨基酸。胞漿區(qū)有286個氨基酸，與EPO受體胞漿區(qū)有一定的同源性。 IL-2Rβ鏈本身無酪氨酸激酶區(qū)，但胞漿區(qū)中有兩個結(jié)構(gòu)域：一個是靠近膜端的絲氨酸富含區(qū)，在IL-2誘導的增殖信號傳遞中起重要作用;另一個是與酪氨酸激酶相聯(lián)的酸性區(qū)域。缺乏酸性區(qū)域的IL-2Rβ鏈突變體能傳導增殖信號，并誘導轉(zhuǎn)錄 c-myc，不能介導誘導轉(zhuǎn)錄因子Fos的作用； 缺乏絲氨酸富含區(qū)的 IL-2Rβ鏈突變體不能誘導細胞增殖及c-myc的轉(zhuǎn)錄。因此， 酪氨酸激酶途徑似乎與 c-fos基因的誘導有關(guān)，而非激酶依賴的途徑與c-myc基因的誘導有關(guān)。IL-2Rβ鏈主要分布于T細胞、大顆粒淋巴細胞（LGL）、B細胞、pre-T 細胞。
（3）IL-2Rγ: 糖蛋白，含347個氨基酸，分子量64kDa。胞膜結(jié)構(gòu)特征屬于紅細胞生成素家族成員，胞漿區(qū)含86個氨基酸，從288～321位氨基酸序列似乎同源于src同源區(qū)2（SH2）， 此區(qū)能與一些磷酸化蛋白中磷酸化酪氨酸殘基相連，參與信號的轉(zhuǎn)導。 IL-2Rγ鏈表達于多種淋巴樣細胞表面，如Molt-β、Molt-4、Jurkat、MT-1、MT-2以及EB病毒感染的Raji細胞。
?。?）IL-2R的組成與親和力的關(guān)系: 單獨IL-2Rγ鏈不能結(jié)合IL-2，但對于中親和力IL-2R（βγ鏈）、高親和力IL-2R（αβγ鏈）的組成、IL-2的內(nèi)化以及信號轉(zhuǎn)導是必需的。 X-性聯(lián)重癥聯(lián)合免疫缺陷癥病人的IL-2Rγ基因發(fā)生突變而喪失IL-2R功能。
表4-2 三種親和力IL-2R的組成
組成
親和力（Kd）
細胞分布舉例
α鏈（p55，CD25）
低，10-8M
B淋巴細胞
β鏈（p70，CD122）+γ鏈
中，10-9M
YT（NK細胞株），MLA144
α鏈+β鏈+γ鏈
高，10-11M
PHA刺激母細胞，HUT102B2
?。?）可溶性IL-2R: 可溶性IL-2R（soluble IL-2 receptor, sIL-2R） 是膜結(jié)合形式IL-2Rα鏈的脫落物，分子量45kDa。在人類T細胞白血病Ⅰ型病毒（HTLV桰）感染的HUT102B2細胞培養(yǎng)上清中含有大量sIL-2R。PBMC經(jīng)絲裂原、CD3 McAb和同種異體抗原刺激后可釋放sIL-2R。正常人血清和尿液中亦可檢出少量sIL-2R。sIL-2R可能與膜表面IL-2R（mIL-2R）競爭結(jié)合IL-2，從而成為一種免疫抑制物質(zhì)。sIL-2R增高可見于某些惡性腫瘤、自身免疫病、 病毒感染性疾病以及移植排斥等（見本章第三節(jié)）。
4. IL-2的生物學作用 IL-2的作用具有沿種系譜向上有約束性，向下無約束性的特點，如人的IL-2能促進小鼠T細胞的增殖，而小鼠的IL-2不能維持人T細胞的生長。IL-2體內(nèi)的半衰期只有6.9分鐘。有報道用PEG對IL-2加以修飾，對生物學活性無影響， 半衰期可延長7倍左右。目前關(guān)于IL-2的生物學作用大都是體外實驗的結(jié)果。具有中和活性的抗IL-2抗體可抑制IL-2的生物學活性。
（1）Th、Tc和Ts細胞都是IL-2的反應(yīng)細胞: IL-2對靜止T細胞作用較弱。 胸腺細胞和T細胞經(jīng)抗原、有絲分裂原或同種異體抗原刺激活化后有在 IL-2存在的條件下進入S期, 維持細胞的增殖。IL-2可刺激T細胞轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（TfR, CD71）、胰島素受體、MHCⅡ 類抗原的表達，并產(chǎn)生多種淋巴因子如IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-6、TNF-β及CSF等。
?。?）誘導CTL、NK和LAK等多種殺傷細胞的分化和效應(yīng)功能，并誘導殺傷細胞產(chǎn)生IFN-γ、TNF-α等細胞因子。IL-2可增強CTL細胞穿孔素（perforin）基因的表達。
?。?）直接作用于B細胞，促進其增殖、分化和Ig分泌。已發(fā)現(xiàn)活化的B細胞也可具有IL-2R，IL-2對B細胞的調(diào)節(jié)作用除通過刺激T細胞分泌B細胞增殖和分化因子外， 還可能有直接的調(diào)節(jié)作用。
?。?）活化巨噬細胞。
5. IL-2的臨床應(yīng)用 目前重組IL-2已用于臨床治療腫瘤以及感染性疾病等。
?。?）抗腫瘤: IL-2在體外可誘導PBMC或腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）成為淋巴因子激活的殺傷細胞（LAK）。LAK/IL-2對腎細胞癌、黑素瘤、非何杰金氏淋巴瘤、結(jié)腸直腸癌有較明顯療效，對肝癌、卵巢癌、頭頸部鱗癌、膀胱癌、肺癌等有不同程度的療效。近年來已開始采用IL-2基因治療對黑素瘤、腎細胞癌以及神經(jīng)母細胞瘤等腫瘤等進行臨床驗證。
?。?）治療感染性疾病:動物實驗結(jié)果表明,IL-2對某些因細胞免疫功能低下而受病毒感染,需增強細胞免疫功能的病人有一定療效。IL-2本身無直接抗病毒活性,它是通過增強CTL、NK活性以及誘導IFN-γ產(chǎn)生而介導抗病毒感染的。目前用IL-2治療活動性肝炎已顯示出可喜的苗頭，對于單純皰疹病毒感染、AIDS?。ㄒ堰M入Ⅱ期臨床驗證）、結(jié)節(jié)性麻風、結(jié)核桿菌感染等也有一定療效。如rIL-2明顯延長結(jié)核桿菌H37RV株感染小鼠和豚鼠的半數(shù)死亡時間，降低死亡率，減少感染動物脾、肺組織內(nèi)的結(jié)核桿菌數(shù)。
?。?）免疫佐劑作用（adjuvanticity）: 應(yīng)用IL-2作為佐劑與免疫原性弱的亞單位疫苗聯(lián)合應(yīng)用，可提高機體保護性免疫應(yīng)答的水平。此外，zui近發(fā)現(xiàn)IL-2具有降低血壓作用，IL-2治療高血壓已進入Ⅰ期臨床驗證。
?。?）國外采用IL-2白喉毒素融合蛋白治療類風濕性關(guān)節(jié)炎進入Ⅰ/Ⅱ期臨床驗證，約有74％ 患者病情得到改善，IL-2融合毒素主要作用于CD4陽性淋巴細胞，有較好的選擇性。 rIL-2體內(nèi)大劑量使用毒性作用較大，可引起毛細血管滲漏綜合征（capillary leak sy-ndrome, CLS）。此外，IL-2半衰期短，有時還可在體內(nèi)誘導產(chǎn)生一定抗體。
美國Immunex應(yīng)用抗IL-2Rα鏈 McAb預(yù)防骨髓移植后GVHR進入Ⅱ期臨床試驗。
檢測原理:
特異性（SPECIFICITY）:
試劑盒組成（KIT CONTENT）:
保存:貯藏于2-8℃.
樣品類型（SAMPLE TYPES）:
樣品采集:
警告及注意事項:
1.不能使用過期產(chǎn)品.
2.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置.
準備工作:
操作步驟:
結(jié)果判斷:
舉例:
靈敏度（SENSITIVITY）:
檢測范圍（RANGE）:
參考值:
交叉反應(yīng)（CROSS REACTION）:
