1 檢測原理

克侖特羅膠體金試紙卡應(yīng)用了競爭抑制免疫層析的原理，樣本中的克侖特羅在流動過程中與膠體金標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合，抑制了抗體和 NC 膜檢測線（T 線）上的克侖特羅—BSA偶聯(lián)物的結(jié)合，從而導(dǎo)致檢測線顏色深淺的變化。當(dāng)樣本中沒有克侖特羅或克侖特羅濃度低于檢測，T線顯色；當(dāng)樣本中的克侖特羅濃度等于或高于檢測，T線不顯色；而無論樣本中是否含有克侖特羅，質(zhì)控線（C 線）都會顯色，以示檢測有效。

2 適用范圍

本產(chǎn)品適用于尿液、組織、飼料樣本中克侖特羅的定性檢測。

3 檢出限

    1）尿樣： 3ng/mL（3ppb）；

2）組織： 3ng/g（3ppb）；

3）飼料： 3ng/g（3ppb）。

4 產(chǎn)品組成

1）克侖特羅膠體金試紙卡（20支）；     

2）一次性吸管（20支）；

3）說明書（1份）。

5 樣本前處理方法

5.1尿樣樣本處理方法如下：

1）直接取澄清新鮮無污染尿樣待檢（注意：尿樣不要在冷藏后立即進行檢測。尿樣樣本必須收集在潔凈、干燥、不含有任何防腐劑的塑料尿杯或玻璃容器內(nèi)，如尿樣混濁，可在室溫4000r/min條件下離心5min處理后待檢。如尿樣樣本不能及時檢測，可于(2～8)℃冷藏保存24小時，長期保存需冷凍 -20℃，切忌反復(fù)凍融樣本）。

5.2組織樣本方法一處理方法如下：

1）稱取(5.0±0.05)g勻質(zhì)的肌肉組織樣本于50mL塑料離心管中，固定在漂浮泡沫墊上置于90℃以上水浴鍋中水浴10min；

2）冷卻至常溫后，取(2～3)滴煮出的溶液檢測（盡量吸取肉汁中上清）。

5.3組織樣本方法二處理方法如下：

1）稱取(5.0±0.05) g組織，加入5g，再加入5mL乙腈，振蕩3min，在4000r/min的條件下離心10min；

2）取4mL上清液于潔凈試管，56℃水浴空氣流或氮氣流吹干后用0.3mL純凈水復(fù)溶，振蕩混合1min，溶解后的液體直接用于檢測。

5.4飼料樣本處理方法如下：

1）稱取(5.0±0.05 )g飼料，加入10mL純凈水，再加入5mL乙酸乙酯，振蕩(3～5)min，4000r/min離心10min；

2）取2mL上清液于潔凈試管，56℃水浴空氣流或氮氣流吹干后，加入0.3mL純凈水與2mL正己烷，振蕩1min，4000r/min離心5min，除去上層液體，取下層液體2滴檢測。

注：克侖特羅、萊克多巴胺、組織和飼料樣品可以處理后三個項目進行同時檢測。

6 操作步驟

1）從原包裝袋中取出試紙卡，打開后請在一個小時內(nèi)盡快使用；

2）用一次性吸管吸取待檢樣本垂直滴加 (2～3)滴（約 70uL）于加樣孔中；

3）液體流動時開始計時，反應(yīng) (5～8)min后，根據(jù)示意圖判定結(jié)果。其他時間判定無效。

7 結(jié)果判斷

根據(jù)顯色不同，可作如下定性判斷（如圖1所示）：

1）陰性（-）：C 線顯色，T 線顯色（與C線比較），均表示樣本中克倫特羅濃度低于檢出限；

2）陽性（+）：C 線顯色，T 線不顯色，均表示樣本中克倫特羅濃度等于或高于檢出限；

3）無效：未出現(xiàn) C 線，表明不正確的操作過程或試紙卡已失效。在此情況下，應(yīng)再次仔細閱讀說明書，并用新的試紙卡重新測試。

                           陰性                                      陽性                          無效

圖1 結(jié)果判定示意圖

8 注意事項                                                                               

1）請按照操作步驟進行測試，盡量不要觸摸試紙卡的白色膜面，檢測時避免陽光直射；

2）本試紙卡為一次性產(chǎn)品，請勿重復(fù)使用；

3）本產(chǎn)品檢測結(jié)果僅供參考，如需確證，請參照國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)方法。

9 特異性

1）本產(chǎn)品與萊克多巴胺、苯乙醇胺A、多巴酚丁胺等β-受體激動劑藥物無交叉反應(yīng)，除上述三種β-受體激動劑藥物外其他β-受體激動劑類藥物交叉未知；

2）本產(chǎn)品與、、四環(huán)素、磺胺類、喹諾酮類等其他種類藥物無交叉反應(yīng)。

10 儲存及有效期

1）儲存條件：儲存試紙卡于4℃～20℃陰涼避光干燥環(huán)境中；

2）有效期：該產(chǎn)品有效期為12 個月。