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Applied Biosystems7500型定量PCR儀主要特點;
● 五色熒光檢測,應用更廣泛全面,包括:基因表達分析,病原體定量分析,SNP基因型分析以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定
● 新型光路設計支持更多的熒光標記檢測,包括:FAM/SYBR Green I, VIC/JOE, NED/TAMRA/Cy3, ROX/Texas Red,和Cy5; 更好的激發(fā)光源設計使長波長紅色熒光的檢測靈敏度大大提高
● 強大靈活的反應板設置指南軟件使反應板設置非常方便,*的實驗結果顯示與分析工具使實驗數據的分析處理更簡單直觀
● 新型半導體熱循環(huán)系統(tǒng)支持96孔板和單一0.2ml反應管。
● 將來可以升級至超速定量PCR反應模式,大大縮短定量PCR反應時間
● 體積小,采用手提電腦或臺式電腦,適用于任何空間的實驗室。
賽默飛ABI 7500熒光定量PCR儀主要應用;
實時定量PCR應用廣泛,包括基于相對定量分析的基因表達分析,以標準曲線為基礎的病原體定量分析,定性的PCR擴增后核酸序列的SNP基因型分析,以及以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定
快速熱循環(huán)
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的標準模式采用25-100微升反應體積,可以采用96孔板或單管/8聯管進行實驗反應。另外7500還可以升級為快速熱循環(huán)樣品基座,該升級為選購件,由AB公司工程師負責安裝??焖贌嵫h(huán)樣品基座采用新型96孔反應板,這種反應板的管內液體上方的空間較小,可以支持5-30微升反應體積的實驗。采用樣品基座升級后的7500,新型96孔反應板和新型快速熱循環(huán)定量PCR預混試劑,實時定量PCR實驗可以在40分鐘內完成,實驗效果與標準2小時模式**。
實時定量PCR系統(tǒng)分析軟件;
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)軟件采用Windows XP操作系統(tǒng),進行儀器控制,數據收集和數據分析,軟件功能強大,界面友好,包括如下特色:
● 反應板設置指南,使實驗設計非常簡單,即使是復雜的多重定量實驗也是如此。
● 擴增反應曲線的實時監(jiān)測
● 自動設定熒光基線,自動計算熒光閾值使實驗結果分析大大簡化
● 采用標準曲線進行靶基因的定量
● 基因表達相對定量軟件提供強大的分析顯示,可以自動將多達10塊96孔板基因表達實驗的數據同時分析,并自動去除無關項數據,該軟件為選購件
● 自動SNP分型軟件以直觀的圖表輸出分型結果并自動進行分型質量評分
● 解離曲線數據采集操作簡單觀察方便,可以在儀器運行時觀察解離曲線數據
● 觀察實時擴增曲線時可以非常方便的標定所對應的樣品孔位置
● 光源使用時間監(jiān)測及儀器系統(tǒng)自我診斷程序
熒光信號檢測:
7500型實時熒光定量PCR系統(tǒng)的全部96個樣品孔采用同一鹵鎢燈作為光源,鹵鎢燈光通過五色光源濾光片后激發(fā)每一個分析樣品。鹵鎢燈光源增加光源濾光片后改善了長波長紅色熒光標記的激發(fā)效果,可以大大提高紅色熒光檢測的靈敏度和定量分析的準確性。激發(fā)后的熒光再通過五色熒光濾光片到達CCD照相機檢測信號。五色熒光濾光片能夠有效地分辨包括:FAM/SYBR Green I, VIC/JOE, NED /TAMRA/Cy3, ROX/Texas Red和Cy5在內的多種熒光染料。
賽默飛ABI 7500熒光定量PCR儀主要應用;
基于相對定量分析的基因表達分析
以標準曲線為基礎的病原體定量分析
定性的PCR擴增后核酸序列的SNP基因型分析
以陽性內對照為基礎的陽性/陰性結果判定
賽默飛ABI 7500熒光定量PCR儀儀器性能;
7500型快速實時熒光定量PCR系統(tǒng)經過驗證可以達到如下性能指標:
9個數量級的線性范圍;
可以檢測20μL反應體積單一報告熒光TaqMan實驗中僅10個起始拷貝數的模板,其可置信度高達99.7%。
技術參數;
熱循環(huán)系統(tǒng):珀耳帖效應系統(tǒng)
加熱塊規(guī)格:96孔加熱塊
可選耗材:96孔反應板與光學蓋膜/96孔反應板與光學平蓋/0.1mL 8連管與光學平蓋
支持容量:10-30μL
樣本升降溫速率:快速模式:±3.5℃/秒
標準模式:±1.6℃/秒
9600模式:-1.6-+0.8℃/秒
加熱塊極限升降溫速率:5.5℃/秒
溫度范圍:4℃-100℃
溫度精度:設置值/顯示溫度的±0.25℃(35℃至95℃)(時鐘啟動后3分鐘開始測量)
溫度均一性:±0.5℃(35℃至95℃)(時鐘啟動后30秒開始測量)
光學系統(tǒng):五色激發(fā)光濾光片,五色發(fā)射光濾光片和CCD成像系統(tǒng)
安裝時已校準染料:SYBR Green I, FAM , VIC , JOE , NED , TAMRA , ROX ,Texas Red, Cy3 , Cy5
被動參照染料:ROX
數據采集:對所有反應孔收集的所有五色濾片的數據(無論何種反應板設置),試驗結束后反應板設置可修改。
定量PCR運行時間:快速模式不超過2小時
快速模式不超過40分鐘
軟件:應用軟件(基于標準曲線的定量、相對標準曲線、基于比較Ct值的相對定量、融解曲線分析、存在/不存在、基于或非基于實時擴增的基因分型)
引物分析軟件(用于客戶自行設計引物和探針)
尺寸(寬×深×高):34×45×49cm
重量:34kg
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