維生素B12作為痕量元素,生物上屬于重要的螯合物膜劑,由含鈷的卟啉環(huán)作為中心原子組成,鈷是由4個(gè)氮原子、一個(gè)氫和一個(gè)二甲基苯并咪唑組成。維生素B12,為穩(wěn)定的復(fù)合物,在胃酸里一種所謂的內(nèi)源因子幫助下,被小腸下部分吸收。維生素B12缺乏會(huì)導(dǎo)致惡性貧血,這種疾病不是由于維生素B12供給不足,而是因?yàn)槿狈?nèi)源因子。惡性貧血者可服用高劑量的維生素B12。
現(xiàn)有的檢測(cè)程序主要是微生物方法(1),但也有高效液相色譜法和薄層色譜法,這些需要高量的時(shí)間和儀器。
本檢測(cè)試劑盒定量檢測(cè)維生素食品(2)中的維生素B12,要比傳統(tǒng)的微生物分析法(24-48小時(shí))更快,包含樣品預(yù)處理只需2.5-4個(gè)小時(shí)。
二、檢測(cè)原理
維生素B12定量測(cè)試基于酶聯(lián)免疫吸收分析原理。針對(duì)維生素B12的抗體約束在酶標(biāo)板上。樣品維生素B12和維生素B12過氧化物酶結(jié)合物加到酶標(biāo)板孔中。標(biāo)記的酶和游離維生素B12競(jìng)爭(zhēng)抗體結(jié)合位點(diǎn)。在室溫下培育一小時(shí)后,用稀釋的洗滌液洗孔,去掉未結(jié)合物。加入培養(yǎng)基溶液,培育20分鐘,變成藍(lán)色。加入停止液抑制顏色發(fā)展,顏色變成了黃色,ELISA讀數(shù)器測(cè)量黃色,維生素B12濃度間接的和測(cè)試樣品顏色強(qiáng)度成比例。