Qiagen Plasmid Midi Kit質(zhì)粒純化試劑盒12143/12145
轉(zhuǎn)染效率與質(zhì)粒純化方法。
采用不同方法制備pRSVcat DNA,通過脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染將其導(dǎo)入的細(xì)胞系內(nèi),40小時(shí)后測定CAT表達(dá)水平,確定轉(zhuǎn)染效率。每個(gè)柱形代表4個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)錄的平均值(2個(gè)質(zhì)粒制備物分別轉(zhuǎn)染2次)。使用QIAGEN Plasmid Kit可獲得zui高的轉(zhuǎn)染效率。
Qiagen Plasmid Midi Kit質(zhì)粒純化試劑盒12143/12145
性能
QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN陰離子交換柱技術(shù)高效純化質(zhì)粒DNA。產(chǎn)量可達(dá)10 mg(Giga)、2.5 mg(Mega)、500 µg(Maxi)、或100 µg(Midi)高拷貝質(zhì)粒DNA(培養(yǎng)體積取決于質(zhì)??截悢?shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基。)QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:轉(zhuǎn)染(參見"Transfection efficiency versus plasmid purification method")、克隆和體外轉(zhuǎn)錄。
原理
QIAGEN-tips內(nèi)*的陰離子交換樹脂專為純化核酸設(shè)計(jì)。它*的分離特性,使純化的DNA的純度相當(dāng)于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作,縮短了純化質(zhì)粒的手動(dòng)操作時(shí)間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免*、氯FANG、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì),減小對(duì)使用者和環(huán)境的危害。
操作流程
使用QIAGEN Plasmid Kits,細(xì)菌裂解物通過離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱,質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)牡望}條件和pH條件下與樹脂進(jìn)行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除,用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA(參見"QIAGEN Plasmid Kit procedures")。得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后,離心收集。
應(yīng)用
QIAGEN Plasmid Kits純化質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用,如:
轉(zhuǎn)染
克隆
PCR
體外轉(zhuǎn)錄
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QIAGEN Plasmid Midi Kit (100) 100 QIAGEN-tip 100, Reagents, Buffers | 12145 | 詢價(jià) | ||
QIAGEN Plasmid Midi Kit (25) 25 QIAGEN-tip 100, Reagents, Buffers | 12143 | 詢價(jià)
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