菌落總數(shù)的快速測定方法 適用范圍：可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測定。也可用于與食品接觸的容器、操作臺和其他設備表面的衛(wèi)生檢測。
菌落總數(shù)的快速測定方法
1 適用范圍 ： 可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測定 。 也可用于與食品接觸的容器 、 操作臺和其他設備表
面的衛(wèi)生檢測。
2 方法原理：將營養(yǎng)培養(yǎng)基、凝膠和氯化三苯基四氮唑（ TTC ）顯色劑等加載在試紙片，經(jīng)加樣、培養(yǎng)后，
細菌菌落在測試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑，通過計數(shù)報告結果。
3 操作方法
3.1 樣品處理 ： 無菌稱取樣品 25g （ 或 25mL ） 放入含有 225mL 無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi) ， 經(jīng)充分
振搖 （ 均質(zhì) ） 做成 1:10 的稀釋液 。 用 1mL 滅菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1mL ， 注入含有 9mL 滅菌生理鹽水的試
管內(nèi) ， 用 1mL 滅菌吸管反復吸吹制成 1:100 的稀釋液 。 以此類推 ， 做出 1:1000 等稀釋度的稀釋液 ， 每個稀釋
度更換一支滅菌吸管。
3.2 接種：一般食品選 2 ～ 3 個稀釋度進行檢測，含菌量少的液體樣品（如食用純水和礦泉水等）可直接用
原液檢測 。 將測試片放在水平臺面上 ， 揭開上面的透明薄膜 ， 用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液 1mL ， 均勻
加到中央的紙片上，輕輕將上蓋膜放下，靜置 5 min 使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下。每個稀釋度接
種兩片。
3.3 培養(yǎng) ： 將測試片疊在一起放回原自封袋中 ， 透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi) ， 堆疊片數(shù)不超過 12 片 。
培養(yǎng)溫度為 36 ℃± 1 ℃ ，培養(yǎng) 15 ～ 24h 。
4 結果判斷與計數(shù)：
4.1 細菌在紙片上生長后會顯示紅色斑點 ， 選擇菌落數(shù)適中 （ 10 個～ 100 個 ） 的紙片進行計數(shù) ， 乘以稀釋倍
數(shù)后即為每克（或毫升）樣品中所含的細菌菌落總數(shù)。菌落數(shù)在 100 以內(nèi)時，按實有數(shù)報告。大于 100 時 ，
用二位有效數(shù)字，二位有效數(shù)字后面的數(shù)字，以四舍五入方法計算，并以 10 的指數(shù)來表示。
4.2 計數(shù)原則與報告方式
4.2.1 通常選擇菌落在 10 個～ 100 個之間的紙片進行計數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)報告之（見下表中例次 1 ） 。國家
標準菌落總數(shù)報告方式術語為 cfu/g 或 mL ， cfu 的含義為菌落形成單位。
4.2.2 若有兩個稀釋度的菌落數(shù)在 10 個～ 100 個之內(nèi)，兩者的比值小于 2 ，則取其平均數(shù)，若大于 2 ，則采
用稀釋度小者報告。
4.2.3 若三個稀釋度的菌落數(shù)都有在 10 個～ 100 個之內(nèi)時，應選擇二個低數(shù)值的平均數(shù)。
4.2.4 若三個稀釋度的菌落數(shù)均小于 10 個或大于 100 個時 ， 應重新試用更低或更高的稀釋度進行菌落計數(shù) ；
或采用均小于數(shù)量標準的zui小值，或采用均大于數(shù)量標準的zui大值。
5 表面取樣方法 ： 加 1mL 滅菌生理鹽水在測試片上 ， 靜置至少 1h 使培養(yǎng)基凝固 ； 提起上層膜 ， 使中央濾紙
部分貼到待測物表面，用手在外側輕壓；然后將上蓋膜合上，置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
6 注意事項：使用過的紙片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
：李菲     :