　　2 檢測(cè)原理：膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍(lán)色)，有機(jī)磷或氨基甲酸脂類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶有抑制作用，使催化、水解、變色的過(guò)程發(fā)生改變，由此判斷樣品中是否含有過(guò)量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留。

　　3 檢測(cè)試材

　　3.1 固化有膽堿酯酶和靛酚乙酸酯試劑的。

　　3.2 乙酸乙酯

　　3.3 pH7.5磷酸鹽浸提(緩沖)溶液：分別取15.0g磷酸氫二鈉 [Na2HPO4·12H2O]與1.59g磷酸二氫鉀[KH2 PO4 ]，用500mL蒸餾水溶解。

　　3.4 稱量天平

　　3.5 有條件時(shí)配備專為而設(shè)計(jì)的“農(nóng)藥殘留速測(cè)儀”和超聲波提取器。

　　4 蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留量的檢測(cè)、結(jié)果判斷與注意事項(xiàng)

　　4.1 表面測(cè)定法(粗篩法)：擦去蔬菜表面泥土，滴2～3滴浸提液在蔬菜表面，用另一片蔬菜在滴液處輕輕摩擦。取一片速測(cè)卡，將蔬菜上的液滴滴在白色藥片上。放置10min進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，將速測(cè)卡對(duì)折(紅色藥片與白色藥片疊合)后，用手捏3min時(shí)，打開(kāi)與空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽(yáng)性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對(duì)照卡相同為陰性結(jié)果。有條件時(shí)，將紙片插入“農(nóng)藥殘留速測(cè)儀”自動(dòng)恒溫、定時(shí)檢測(cè)。

　　4.2 整體測(cè)定法：選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見(jiàn)方碎片，取5g放入帶蓋瓶中，加入10mL浸提液(樣品與浸提液的比例為1+2)，震搖50次(有條件時(shí)，可將提取瓶放入超聲波提取器中震蕩30秒)，靜置2min以上。取一片速測(cè)卡，在白色藥片上滴上2～3滴提取液，放置10min進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，將速測(cè)卡對(duì)折(紅色藥片與白色藥片疊合)后，用手捏3min時(shí)，打開(kāi)與空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽(yáng)性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對(duì)照卡相同為陰性結(jié)果。有條件時(shí)，將紙片插入“農(nóng)藥殘留速測(cè)儀”自動(dòng)恒溫、定時(shí)觀察。

　　4.3注意事項(xiàng)：

　　4.3.1目前國(guó)內(nèi)外所使用的農(nóng)藥殘留測(cè)定方法(紙片法和分光光度法)的檢驗(yàn)原理基本相同，測(cè)定中的干擾物質(zhì)也基本相同。蔥、蒜、蘿卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類樣品時(shí)(包括含葉綠素較高的蔬菜)，不要剪的太碎。測(cè)定番茄時(shí)，可將提取液放在茄蒂處浸泡2min，取浸泡液測(cè)定。測(cè)定韭菜或大蒜時(shí)，可整根或整粒放入容器中，加入提取液后振搖提取測(cè)定。

　　4.3.2飲用水中的農(nóng)藥檢測(cè)，可直接取2～3滴加到速測(cè)卡上進(jìn)行操作。茶樹(shù)上茶葉中的農(nóng)藥檢測(cè)，可按本方法測(cè)定，加工后的茶葉，參照“相應(yīng)食物及中毒殘留物中農(nóng)藥的檢測(cè)”。

　　4.3.3檢測(cè)樣品的速測(cè)卡預(yù)反應(yīng)放置的時(shí)間應(yīng)與空白對(duì)照卡放置的時(shí)間盡量*。紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)的時(shí)間控制在3min，打開(kāi)觀察結(jié)果的時(shí)間應(yīng)以1min內(nèi)為準(zhǔn)。

　　4.3.4空白對(duì)照卡不變色的原因，一是有可能藥片表面提取液加的少、預(yù)反應(yīng)后的藥片表面不夠濕潤(rùn)；二是提取液(緩沖液)的酸堿度可能有問(wèn)題(此時(shí)可用純凈水作對(duì)比確認(rèn))；三是操作環(huán)境空氣中可能含有農(nóng)藥殘留。

　　4.3.5在確定樣品為有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，應(yīng)是重復(fù)多次檢測(cè)的結(jié)果，必要時(shí)將樣品送實(shí)驗(yàn)室用氣相色譜儀或質(zhì)譜儀進(jìn)一步確定是哪種農(nóng)藥、確切含量。

　　5 相應(yīng)食物及中毒殘留物中農(nóng)藥的檢測(cè)、結(jié)果判斷與注意事項(xiàng)：

　　5.1樣品處理與測(cè)定：取樣品適量于容器中，加入2倍量的乙酸乙酯，充分震搖后靜置，取澄清液于蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干乙酸乙酯，取1mL磷酸鹽浸提液溶解蒸干后的殘?jiān)?，取殘?jiān)芤?～3滴于速測(cè)卡白色藥片上，放置10min進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，將速測(cè)卡對(duì)折(紅色藥片與白色藥片疊合)，用手捏3min，打開(kāi)速測(cè)卡，與同時(shí)操作的空白對(duì)照速測(cè)卡(白色藥片上只加浸提液的速測(cè)卡)比較，白色藥片不變色為強(qiáng)陽(yáng)性結(jié)果，略有淺藍(lán)色為弱陽(yáng)性結(jié)果，天藍(lán)色或與空白對(duì)照卡相同，為陰性結(jié)果。

　　5.2 注意事項(xiàng)：

　　5.2.1在確定樣品為有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，應(yīng)是重復(fù)多次檢測(cè)的結(jié)果，對(duì)于中毒殘留物，必需將樣品送實(shí)驗(yàn)室用氣相色譜儀或質(zhì)譜儀進(jìn)一步確定是哪種農(nóng)藥、確切含量。

　　5.2.2其他注意事項(xiàng)與蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定注意事項(xiàng)相同。

　　6 的質(zhì)量控制

　　6.1 按操作方法與注意事項(xiàng)進(jìn)行，只加pH7.5磷酸鹽浸提液或純凈水的應(yīng)變?yōu)樗{(lán)色；0.3mg/kg的敵敵畏或敵百蟲(chóng)溶液，可使呈陽(yáng)性反應(yīng)。

　　7. 產(chǎn)品儲(chǔ)藏與效期：速測(cè)卡閉光常溫保存有效期為1年。冷藏可延長(zhǎng)有效期。