- 快速分析,節(jié)約至60%的時間
- 含單細胞靈敏度極熱啟動PCR酶HotStarTaq
- 通用的操作流程用于標準和快速定量PCR儀
- 可特異性檢測低拷貝的模板,準確檢測各種起始量的模板
- 優(yōu)化的即用型預(yù)混液用于快速循環(huán)
原理
QuantiFast SYBR Green PCR Kit 縮減多至60%的PCR運行時間(見圖“明顯縮減時間”),讓您可更快獲取結(jié)果。您也可以大幅度提高樣本通量,或通過與其他用戶共用PCR儀。試劑盒提供*的PCR緩沖夜,包含正在申請的添加劑Q-Bond,可縮減變性、退化和延伸時間(見圖 “引物快速退火”)。緩沖夜也包含HotStarTaq Plus DNA Polymerase,激活該聚合酶在95°C 的條件下只需5分鐘??煽焖佾@取PCR結(jié)果的同時絲毫不影響PCR的表現(xiàn)(見圖“在Applied Biosystems 7500 Fast System工作站上更快獲取結(jié)果,PCR表現(xiàn)有保障”)。
應(yīng)用QuantiFast SYBR Green PCR Kit可獲得高特異、高靈敏的結(jié)果,勝過快速循環(huán)模式下的其他 real-time PCR 試劑盒(見圖 “iCycler iQ上靈敏的兩步法RT-PCR”)??焖貾CR緩沖夜中KCl和NH4Cl 的平衡組合有利于特異引物的退火,支持高特異性的PCR。另外,HotStarTaq Plus DNA Polymerase 確保起始嚴謹,避免形成非特異性的產(chǎn)物。
確保對模板得多個稀釋倍數(shù)可精確定量分析靶分子。即使是差異較小的低拷貝也可有明顯的差異(見圖 “在Mastercycler ep realplex上小差異拷貝的分辨率”)。
過程
是即用型預(yù)混液,無需優(yōu)化反應(yīng)和循環(huán)條件。操作手冊提供可用于所有real-time PCR儀的操作程序。
2x QuantiFast SYBR Green PCR 預(yù)混液組分
組分 | 特性和優(yōu)點 |
HotStarTaq Plus DNA Polymerase | 95ºC 下激活只需5分鐘,確??焖賴乐?shù)膯印?/p> |
QuantiFast SYBR Green PCR Buffer | *的緩沖夜成分,包含Q-Bond,縮減變性、退火和延伸時間,離子平衡有利于特異性引物延伸。 |
dNTP Mix | dATP、dCTP、 dGTP和dTTP混合物 |
SYBR Green I dye | 結(jié)合雙鏈DNA,產(chǎn)生強烈的熒光信號。無需設(shè)計序列特異性探針,可定量分析任何靶分子。 |
ROX dye | Applied Biosystems與任意Stratagene儀器上熒光信號標準化 。在任何real-time R儀上不干擾PCR反應(yīng)。 |
2x QuantiFast SYBR Green PCR 預(yù)混液可儲存在2-8ºC,無需解凍反應(yīng)組分,可更快構(gòu)建反應(yīng)體系。
應(yīng)用
適用于任何real-time PCR儀,包括Applied Biosystems、Bio-Rad、Cepheid,、Corbett、Eppendorf、 Roche和Stratagene的儀器。
為了獲得*的real-time兩步法RT-PCR結(jié)果,我們推薦使用 QuantiTect Reverse Transcription Kit合成cDNA。該試劑盒可在20分鐘內(nèi)快速合成cDNA,同時去除基因組。除了QuantiTect Reverse Transcription Kit 還可應(yīng)用FastLane Cell cDNA Kit,該試劑盒可直接從培養(yǎng)細菌中制備cDNA,沒有純化RNA。如果只有少量的RNA模板,我們建議應(yīng)用QuantiTect Whole Transcriptome Kit制備cDNA存檔,該試劑盒可均一擴增靶分子,確??煽康幕虮磉_分析。
對于兩步法real-time RT-PCR我們也推薦QuantiTect Primer Assays ,這是全基因組的,多樣的,經(jīng)驗證的引物系列。
對于普通PCR,我們推薦QIAGEN Fast Cycling PCR Kit,該試劑盒基于與QuantiFast Kits同樣的技術(shù),可在任何PCR儀上實現(xiàn)快速、特異性PCR 。
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上海力敏實業(yè)有限公司代理qiagen產(chǎn)品,咨詢
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