KOD -Plus-系列酶（TOYOBO）KOD-201
| 特征1. 優(yōu)良的保真性 | |
| KOD -Plus-系列的酶具有強(qiáng)力3'→5'核酸外切酶活性（Proof-reading活性），相比KOD DNA polymerase，保真性更高，約為Taq DNA polymerase的80倍。zui適用于克隆。 |
特征2. 通過熱啟動(dòng)提高了PCR反應(yīng)效率
通過將2種抗KOD單克隆抗體預(yù)混在酶中，抑制了PCR反應(yīng)前常溫狀態(tài)下的多聚酶活性和
3'→5'核酸外切酶活性（該活性是產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的主要原因）?？贵w在PCR的zui初變
性步驟即發(fā)生失活，對(duì)擴(kuò)增反應(yīng)沒有任何影響。
特征3. 延伸性?擴(kuò)增效率的提高
對(duì)反應(yīng)Buffer的組成進(jìn)行了*化的重組，使之較以往的KOD DNA polymerase延伸性?擴(kuò)
增效率均有很大的提高。
特征4. 超群的耐熱性
因其耐熱性比Taq DNA Polymerase更為優(yōu)良，故可以將熱變性步驟的溫度設(shè)定值提高，對(duì)
GC-rich等容易形成高級(jí)結(jié)構(gòu)的目的片段尤其適用。
特征5. 高PCR成功率【KOD -Plus- Ver.2】
對(duì)難擴(kuò)增的目的片段、長目的片段的PCR成功率比KOD -plus-更高。另外，也降低了帶入的
逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液對(duì)PCR反應(yīng)的抑制。
＜幾點(diǎn)建議＞
●PCR產(chǎn)物的克隆
由于本酶的PCR產(chǎn)物已被平滑化，可用平滑末端克隆法進(jìn)行克隆。此時(shí)，如已對(duì)載體進(jìn)行了脫磷酸化處理，就需要對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行磷酸化，或使用帶5'磷酸基的引物?！×硗猓捎诒久傅腜CR產(chǎn)物已被平滑化，不能直接進(jìn)行TA克隆?？墒褂冒匆韵路椒ㄩ_發(fā)的TA克隆試劑盒「TArget Clone -Plus-」。
●PCR條件的設(shè)定 品名 包裝 保存溫度 Code No. 價(jià)格 KOD -Plus- 200U×1 -20℃ KOD-201 RMB 800 （200U×1）×5 -20℃ KOD-201B RMB 3700 200U×1 -20℃ KOD-211 RMB 1000 （200U×1）×5 -20℃ KOD-211B RMB 4600 定點(diǎn)突變導(dǎo)入試劑盒 20次 -20℃ SMK-101 RMB 1500 KOD用TA克隆試劑盒 10次 -20℃ TAK-201 RMB 380 KOD -Plus-用Buffer 1ml -20℃ KOD-2B RMB 50 KOD -Plus-用MgSO4 1ml -20℃ KOD-2S RMB 50 KOD -Plus- Ver.2用Buffer 1ml -20℃ KOD-3B RMB 50
酶的標(biāo)準(zhǔn)使用量為50μl反應(yīng)體系1U。延伸反應(yīng)在68℃條件下進(jìn)行，按1kb目的片段1min.的標(biāo)準(zhǔn)。出現(xiàn)拖尾條帶時(shí)，可降低MgSO4濃度，無法確認(rèn)到擴(kuò)增時(shí)，可提高MgSO4濃度。
●GC-rich模板的情況
在反應(yīng)液中添加終濃度為2?5%的DMSO可得到改善。
●以RT反應(yīng)液為模板的情況
過量帶入RT反應(yīng)液有可能會(huì)對(duì)PCR反應(yīng)產(chǎn)生抑制作用。建議帶入到PCR的RT反應(yīng)液在PCR反應(yīng)液的1/25以下（在1/50以下）。這樣就無需考慮RT反應(yīng)液中Mg2+、dNTPs的影響，只要按照基本反應(yīng)條件添加本酶中添付的dNTPs和MgSO4即可。
相關(guān)產(chǎn)品價(jià)格表 KOD -Plus- Ver.2
品名 包裝 保存溫度 Code No. 價(jià)格
KOD -Plus- Mutagenesis Kit
TArget Clone-Plus-
